c18液相色譜柱在使用中常見(jiàn)的問(wèn)題就是柱壓升高，如果柱壓是在長(zhǎng)時(shí)間使用過(guò)程中緩慢增加，屬于正常現(xiàn)象。但柱壓在使用過(guò)程中突然升高，可能的原因有如下幾點(diǎn)：
1、液相色譜柱頭的過(guò)濾篩板堵塞或污染；
2、色譜柱頭的填料被樣品污染；
3、色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機(jī)溶劑，形成結(jié)晶析出；
4、流動(dòng)相pH值過(guò)大或過(guò)小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解。
液相色譜柱解決辦法如下：
1、如確定是色譜柱頭的過(guò)濾篩板被污染，可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力，或者卸下色譜柱頭，將其放在10%的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘，后再用純水超聲10分鐘，重新裝入色譜柱。
2、如確定c18液相色譜柱頭的填料被污染，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內(nèi)前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔細(xì)修復(fù)后，重新安裝上柱頭螺絲。
3、如確定定是鹽結(jié)晶，用10%的甲醇/水沖洗液相色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解，再換高濃度甲醇。
4、如果因pH值使用不當(dāng)，很難恢復(fù)。
液相色譜柱樣品制備
1、樣品應(yīng)當(dāng)盡可能溶解在能與流動(dòng)相相互溶的溶劑中。除特殊指明外，如使用強(qiáng)溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。
2、樣品溶液在進(jìn)樣前應(yīng)使用針頭式過(guò)濾器對(duì)樣品預(yù)先過(guò)濾。頻繁改變流動(dòng)相組成，會(huì)加速降低柱效。
3、c18液相色譜柱由高壓勻漿法裝填，能承受較高壓力。為獲得*分離效果，使用時(shí)請(qǐng)不要超過(guò)200kgf，而且避免壓力突然上升或變化，否則會(huì)造成硅膠填料的破壞，減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外最高操作溫度不要超過(guò)60℃。
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